生化試劑應(yīng)用常見問題:
1 試劑空白
1 線性范圍變窄 現(xiàn)象：高值測(cè)不高。原因：生產(chǎn)試劑時(shí)有效成分投料量不足；試劑成份穩(wěn)定性較差。1．2 靈敏度變低現(xiàn)象：酶促反應(yīng)速度曲線斜率下降，測(cè)定結(jié)果有嚴(yán)重系統(tǒng)誤差。原因：試劑底物濃度不足。1．3 低值偏高 現(xiàn)象：試劑空白的變化曲線（吸光度VS時(shí)間）明顯波動(dòng)。原因：試劑自身不穩(wěn)定，自行分解；工具酶純度不夠，雜酶含量超限，導(dǎo)致干擾作用。
2 樣品信息
樣品的溶血、脂血、黃疸等會(huì)對(duì)測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生非化學(xué)反應(yīng)的干擾。因此，應(yīng)根據(jù)溶血、脂濁、黃疸的光譜吸收特性，采用雙波長或多波長的檢測(cè)模式，并在結(jié)果計(jì)算中扣除因溶血、脂血、黃疸引起的影響，減少干擾程度。
3 測(cè)定范圍
每種待測(cè)物都有一個(gè)可測(cè)定的濃度或活性范圍，樣品結(jié)果若超過此范圍，分析儀將顯示結(jié)果超過范圍的提示。表示試劑已經(jīng)變質(zhì)，應(yīng)更換合格試劑。
4 底物耗盡
使用連續(xù)監(jiān)測(cè)法、兩點(diǎn)法測(cè)定酶活性時(shí)，若酶活性非常高，底物接近被耗盡，吸光度上升或下降會(huì)超過某一吸光度變化范圍，監(jiān)測(cè)期的吸光度將偏離線性，使測(cè)定結(jié)果不可靠。
5 酶的預(yù)活化
測(cè)定血清中的某些酶，如CK，離體（采血）后很容易失活。失活的原因是酶活性中心的活性基因巰基（一SH）被氧化造成的。只有通過適當(dāng)?shù)倪€原作用才能重新激活。如CK—NAC試劑盒即含有CK活化劑，名為N一乙酰半胱氨酸。實(shí)驗(yàn)研究證明，NAC對(duì)血清中已失活的CK活化過程約需180 S。這就是CK測(cè)定為什么要延遲時(shí)間較長的理論依據(jù)。在AST，ALT采用IFCC推薦方法測(cè)定時(shí)需要磷酸吡哆醛預(yù)活化。需要強(qiáng)調(diào)：含有活化劑的生化試劑，其測(cè)定酶活性的結(jié)果要高些。
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